Sasuke est un ninja du village de Konoha au caractère relativement calme, discret et froid. Il doit faire équipe avec Naruto Uzumaki, avec qui il entretient vite une relation de rivalité et d'amitié à la fois, et Sakura Haruno, qu'il détestait au début mais qui au fur et a mesure va devenir une amie. Tous trois apprennent les arts ninja sous l'autorité de Kakashi Hatake.
Sasuke possède une technique d'½il innée, le Sharingan. Ce dernier lui permet d'anticiper et de copier les mouvements et les coups de ses adversaires. Il est aussi très bon technicien de Taijutsu, et possède un excellent sens tactique.
Froid, distant et détaché, son seul objectif est de venger sa famille de son grand frère Itachi Uchiwa, qui a exterminé son Clan, sa propre famille, alors que Sasuke n'était encore qu'un enfant, soi-disant pour "évaluer son potentiel". La raison véritable du massacre est que le clan allait faire un coup d'état mais Itachi est contre et il a dû massacrer son clan sous les ordres du conseil de Konoha mais quand il a vu son frère, il n'a pas pu le tueur et lui a dit les mots nécessaires pour le haïr pour ensuite être le seul a perpétuer le nom des Uchiwa.
Alors que Sasuke et son équipe participaient à l'examen Chuunin, un personnage nommé Orochimaru survint et le bouleversa. Naruto Uzumaki va partir à la recherche du 5ème Hokage, et à son retour, Sasuke va prendre conscience de la fulgurante progression de son ami/rival. De plus, confronté à son frère, Sasuke va réaliser son manque considérable de puissance par rapport à lui. Plongé dans un profond désarroi et en proie à une profonde amertume, il se "laissera" piéger par Orochimaru, qui lui avait préalablement apposé son sceau (provenant d'une technique interdite), dans l'espoir de vaincre son frère, et ce à n'importe quel prix.
Dans la saison 2, Sasuke, devenu très puissant, se défait de l'emprise d'Orochimaru pendant le rituel de transfert d'âme et parvient à piéger le Sannin dans son corps. Après ça, il libère les cobayes qui étaient prisonniers dans les planques d'Orochimaru et en choisit 3 pour faire équipe avec lui (cette nouvelle team s'appellera Hebi) dans l'espoir de retrouver son frère et de le vaincre définitivement. Deidara se mettra en travers de sa route mais se fera finalement vaincre par l'Uchiha.
Suite à un brève repos, il partira défier Itachi dans le temple des Uchiwa. Bien que théoriquement moins fort que son frère (selon ce dernier) car il ne possède pas le Mangekyou Sharingan, Sasuke réussit à tenir tête à son frère et alors qu'il est sous l'emprise d'Itachi qui a utilisé son Susanoo pour se protéger du Kirin de Sasuke et prendre l'avantage du combat, Sasuke gagne le combat avec l'écroulement soudain de son frère qui lui transmit Amaterasu avant de mourir. Zetsu informe ensuite Madara de la victoire de Sasuke (et aux ninjas de Konoha qui combattaient Madara) et tous les deux partent récupérer les corps de Sasuke inconscient et d'Itachi mort.
Madara raconte ensuite à Sasuke qu'Itachi voulait le protéger en lui transmettant le pouvoir du Mangekyou Sharingan, ceci dans le but de tuer Madara et protéger par la même occasion son petit frère de la vérité sur le massacre du clan Uchiwa que Madara pourrait lui raconter. La technique qu'a utilisée Itachi est inconnue jusqu'à présent mais il semblerait que le simple fait d'avoir touché Sasuke sur le front avant sa mort ait transmis Amaterasu pour qu'il se déclenche automatiquement à la vue du sharingan de Madara.
Madara nous apprend qu'Itachi avait déjà prévu de combattre Sasuke et de mourir de ses mains pour que son jeune frère puisse obtenir le Mangekyou Sharighan. Puis il informe à Sasuke qu'Itachi a déchainé les pouvoirs du Mangekyou Sharingan sur lui pour le pousser aux bouts de ses forces afin qu'Orochimaru se libère de l'emprise de Sasuke. Ainsi, Itachi pouvait se débarasser du Sanin Légendaire et libérer Sasuke du Sceau Maudit du Ciel avec son ultime jutsu (Susanoo). Par la même occasion, Itachi éveillerai Sasuke au Mangekyou Sharingan via sa propre mort, lui qui est la personne la plus parenté à Sasuke. En réalité, d'après Madara, si Itachi avait vraiment voulu tuer son jeune frère, Sasuke serait effectivement mort à l'heure actuel et le fait de prétendre vouloir prendre les yeux de Sasuke pour s'éveiller au Mangekyou Sharingan Eternel comme le fait d'accuser Madara d'être derrière l'attaque de Kyuubi sur Konoha il y a 16 ans étaient des mensonges qu'Itachi a raconté à Sasuke pour que son jeune frère ne puisse jamais croire ce que Madara lui raconterait sur la vérité du massacre du clan Uchiwa.
Madara ajoute qu'Itachi aurait rejoint l'Akatsuki après le massacre du clan Uchiwa dans le but de surveiller de l'intérieur la dangereuse organisation. Et le fait qu'il soit revenu à Konoha après la mort du troisième Hokage qui avait promis à Itachi de veiller sur Sasuke et de ne pas lui raconter la vérité du massacre de leur clan, était un message envoyé à Danzou et aux 2 Conseillers de Konoha pour leur dire qu'il était toujours vivant et qu'ils n'avaient pas intérêt à faire le moindre mal à Sasuke au risque qu'il donne des informations sur Konoha aux puissances ennemies comme il avait dit à Danzo juste avant de quitter Konoha après le massacre. Ensuite Madara dit à Sasuke que si Itachi a réussi à se débarrasser de tout sentiment pour tuer tous ceux qui lui étaient proche pour la paix de Konoha, il n'a pu se résigner à tuer son jeune frère car pour Itachi, Sasuke est encore plus important à ses yeux que Konoha. C'est pourquoi, il voulait toujours rendre Sasuke plus fort en le poussant à le haïr et à chercher la puissance pour non seulement mourir de la main de son jeune frère afin d'expier sa culpabilité du massacre des Uchiwa mais aussi, par la même occasion, pour que Sasuke venge le clan Uchiwa et passe pour un héros aux yeux de Konoha bien qu'Itachi se savait condamner à mourir par sa maladie (en effet dans son combat avec Sasuke, il crache beaucoup de sang).
D'ailleurs, d'après Madara, pour être sûr de ne pas mourir avant son combat planifié par ses soins avec Sasuke, il prit toutes sortes de médicaments pour rester en vie et même s'il savait qu'il serait diminué pour le combat fratricide, il avait estimé ses forces restantes bien suffisantes pour que le combat se déroule comme il l'avait planifié, c'est à dire en laissant Sasuke le vaincre (pour les raisons citées juste un peu plus haut). D'après Madara, malgré la vie infernale qu'a eu Itachi, celui-ci est mort un sourire aux lèvres et lègue à Sasuke, qu'il a réussi trompé jusqu'à sa mort, l'avenir des Uchiwas.
A présent que Sasuke connait la vérité sur Itachi et pleure la perte de celui-ci en se remémorant les beaux jours passés ensemble au temps de leur enfance, le jeune Uchiwa dissout son groupe Hebi pour former une nouvelle équipe nommée Taka (faucon) qui associe les anciens membres d'Hebi et Madara Uchiwa d'Akatsuki et dont le seul but est de se venger en tuant les dirigeants de Konoha. On apprend ensuite implicitement d'après les paroles de Madara que Sasuke a éveillé son Mangekyou Sharingan. Par ailleurs Sasuke semble croire complètement l'histoire d'Itachi et des Uchiwas que Madara lui a raconté. Et bien qu'il connaisse à présent les idées et les aspirations de son grand frère, Sasuke compte suivre son propre chemin et faire revivre le Clan Uchiwa à sa façon.
